簡要描述:EZ640TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(遠紅熒光)采用 TUNEL 法,應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細胞斷裂DNA 的3´-OH 末端催化摻入EZ 640-dUTP。 TUNEL法可以選擇性的檢測凋亡細胞, 而非壞死細胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細胞。
產(chǎn)品分類
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC12L058/AC12L059 |
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規(guī)格 | 20T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
細胞發(fā)生凋亡時, 會激活一些 DNA 內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組 DNA,產(chǎn)生180bp-200bp 的 DNA 片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)的特異的梯狀 Ladder 圖譜?;蚪M DNA 雙鏈或單鏈斷裂時會出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性 3'-OH 末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與dUTP 結(jié)合,從而通過熒光顯微鏡或流式細胞儀直接進行凋亡細胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal - deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有 DNA 的斷裂,因而沒有 3'-OH 形成,很少能夠被染色。Tunel 法可以對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可檢測出極少量的凋亡細胞,因而在細胞凋亡的研究中廣泛采用。
本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,也可檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況??蛇x擇性的檢測凋亡細胞,而非壞死細胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細胞。本試劑盒檢測細胞凋亡,耗時短,只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可檢測。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
EZ 640 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(遠紅熒光) | AC12L058 | 20 T |
EZ 640 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(遠紅熒光) | AC12L059 | 50 T |
產(chǎn)品組分
組分 | 20 T | 50 T |
A.EZ 640 TUNEL Reaction Buffer | 1 mL | 2 × 1.25 mL |
B.TdT Enzyme | 40 μL | 100 μL |
C.Proteinase K (2 mg/mL) | 40 μL | 100 μL |
D.DNase I (2 U/μL) | 5 μL | 13 μL |
E.10 × DNase I Buffer | 100 μL | 260 μL |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃避光保存,有效期24個月。【注】:組分 A 需避光保存,避免反復(fù)凍融。
實驗材料(自備)
PBS緩沖液(1×,pH~7.4)
0.4% Triton X-100(PBS配制)
0.1% Triton X-100(PBS配制,其中含5 mg/mL BSA)
4%多**醛(PBS配制)
免疫組化筆
脫蠟溶劑(石蠟切片樣本)
石蠟切片處理相關(guān)試劑
抗熒光淬滅封片劑
ddH2O
注意事項
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。
染色背景較重或非特異性著色明顯時可適當(dāng)減少染色時間。
實驗時建議增加陰性對照和陽性對照組。
組分A使用時請佩戴口罩、手套,如接觸皮膚,請立即用大量水沖洗。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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